Hierdurch erhalten Sie beispielsweise Informationen zur Zellviabilität, Ausbildung definierter Oberflächenmoleküle, Genexpression, zum Zellmetabolismus oder zur Proteinsekretion. Zusätzlich können wir die Änderungen einiger Parameter über einen zeitlich definierten Verlauf bestimmen.
Bestimmung von Bindeaffinitäten mittels Oberflächenresonanz Spektroskopie (surface plasmon resonance (SPR) spectroscopy).
Das am Translationszentrum des Fraunhofer/ISC vorhandene Gerät (Reichert Technologies, 4SPR) erlaubt die Bestimmung der kinetischen und thermodynamischen Bindekonstanten zwischen verschiedenen Interaktionspartnern. Hierfür müssen keine Modifikationen an den zu untersuchenden Stoffen unternommen werden (label free). Durch die modulare Gestaltung des Messgerätes, lassen sich SPR Messungen auch mit anderen Methoden (u.a. Elektrochemie oder Fluoreszenzmikroskopie) verknüpfen.
Die Durchflusszytometrie ermöglicht die Analyse physikalischer, zellulärer und molekularer Eigenschaften von Partikeln (Zellen, Nanopartikeln etc.). So können z. B. unterschiedliche Zelltypen anhand ihrer Größe und Morphologie in heterogenen Zellgemischen phänotypisiert und zeitgleich analysiert werden. Neben der quantitativen Bestimmung von Oberflächenmolekülen können auch intrazelluläre Proteinprofile bestimmt werden. Zusätzlich ermöglicht die Durchflusszytometrie die Analyse von DNA- und Zellzykluseigenschaften als auch epigenetischer Merkmale.
Zur Beurteilung der Viabilität einer Zelle und ihres Metabolismus wird deren ATP-Gehalt, die Glukoseverbrauchsrate und Pyruvatproduktion mittels hochsensitiver Assays bestimmt. Verwendung findet weiterhin die nicht-invasive Impedanz-basierte xCELLigence-Methode, die die simultane Beurteilung eines breiten Portfolios zellulärer Eigenschaften, wie die Kontrolle der Zellproliferation, Morphologie, Viabilität, Adhäsion und Migration, ermöglicht.
Wir analysieren die Expression Ihrer gewünschten Zielgene mittels quantitativer RT-PCR. Hierdurch lassen sich mögliche Einflüsse definierter Substanzen auf das Genexpressionsprofil von Zellkulturen oder Gewebemodellen analysieren.
Zur Optimierung und Qualitätskontrolle Ihres Bioprozesses quantifizieren wir ein breites Spektrum an Metaboliten im Zellkultur- oder Fermentationsmedium, u.a. Glukose, Alanin-Glutamin, Glutamin und Laktat. Mittels LDH-Assay sind zusätzlich Aussagen zum Level des Zellstresses möglich. Für die automatisierte Messung wird lediglich ein sehr geringes Mediumvolumen (50 µl) benötigt.
Über diese Technologie können Änderungen im Gewebemetabolismus verfolgt werden, worüber sich Aussage über den Gewebestatus beispielsweise bei Tumoren oder während der Wundheilung treffen lassen.
Wir quantifizieren das Vorkommen Ihrer gewünschten Zielproteine (z. B. intrazelluläre oder sekretierte Zytokine) mittels ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay), Western blot oder Durchflusszytometrie. Hierdurch lassen sich mögliche Einflüsse definierter Substanzen auf Zellkulturen oder Gewebemodelle analysieren.
Fraunhofer-Institut für Silicatforschung ISC